keluasan
Elektroforesis adalah teknik yang digunakan dalam analisis makmal yang mengeksploitasi jisim molekul dan caj protein protein untuk menilai kuantiti dan kualiti mereka . Khususnya, peperiksaan ini membolehkan pemisahan protein menjadi lima pecahan : albumin, alfa 1 globulin, alfa 2 globulin, beta globulin dan gamma globulin . Perubahan hubungan antara jenis protein ini menunjukkan beberapa keadaan patologi. Elektroforesis boleh dilakukan pada sampel serum darah, air kencing atau cecair biologi yang lain, seperti minuman keras (cecair cerebrospinal).
Juga dikenali sebagai elektroforesis protein atau protidogramma, ujian ini dilakukan dengan mengamalkan kaedah yang sangat tertentu: medan elektrik diterapkan pada sampel, berkat protein "kumpulan" mengikut jenis. Sebenarnya, setiap protein yang menganalisis elektroforesis mempunyai jisim molekulnya sendiri dan cas elektrik, yang membolehkan mereka bertindak balas terhadap tekanan, dibekalkan oleh arus langsung, dengan cara yang khas. Di bawah keadaan biasa, contohnya, puncak jangkaan pertama - lebih tinggi dan lebih sempit - dalam jalur electrophoretic sepadan dengan albumin .
Dalam istilah yang lebih praktikal, elektroforesis adalah analisis yang digunakan untuk menentukan:
- Kehadiran protein tidak normal;
- Ketiadaan protein biasa;
- Sekiranya sekumpulan protein hadir dalam jumlah yang lebih kecil atau lebih besar daripada biasa.
Elektroforesis boleh diminta oleh doktor sebagai sebahagian daripada peperiksaan kawalan (analisis rutin) atau prosedur diagnostik, yang dalam kes di mana analisis makmal lain telah menunjukkan perubahan dan adalah perlu untuk memperdalam atau mengesahkan syak wasangka klinikal.
apa
Elektroforesis adalah analisis makmal yang menyediakan maklumat penting mengenai jumlah protein yang terdapat dalam serum darah atau dalam sampel biologi lain dan, untuk setiap pecahan, mendedahkan jika terdapat sebarang anomali dari segi kualiti. Ini adalah mungkin dengan menggunakan medan elektrik, mengeksploitasi mobiliti elektroforetik protein; penghijrahan makromolekul ini dipengaruhi oleh jisim, saiz, caj dan bentuknya.
Khususnya, ujian ini membolehkan pemisahan protein menjadi lima kumpulan : albumin, alpha 1 globulin, alpha 2, beta dan gamma .
Hasil elektroforesis membolehkan untuk mengkaji kepekatan parameter ini: kemungkinan perubahan hubungan antara kumpulan protein ini diperhatikan semasa beberapa keadaan patologi. Oleh itu, elektroforesis berguna dalam mengesahkan diagnosis dan, setelah penyakit itu telah ditentukan, mengikuti pesakit dalam susulan .
Elektroforesis: di mana sampel boleh dilakukan?
Sampel biologi yang mana elektroforesis boleh digunakan terutamanya:
- Serum : elektroforesis seroprotein atau elektroforesis protein serum;
- Urine : elektroforesis urin atau elektroforesis protein kencing;
- Liquor (cecair cerebrospinal) : elektroforesis protein minuman keras (nota: minuman keras adalah cecair yang meresap dan melindungi otak, saraf tunjang, saraf kranial dan akar tulang belakang).
Elektroforesis: apa yang diukur
Protein plasma adalah penunjuk yang sangat penting: sebarang perubahan dalam kepekatan mereka boleh memberi isyarat kepada kehadiran pelbagai penyakit.
Dengan elektroforesis adalah mungkin untuk memisahkan protein berikut dalam sampel:
- Albumin ;
- Globulin Alpha 1 ;
- Alpha 2 globulin ;
- Globulin beta ;
- Gamma globulins .
Pada masa ini, banyak makmal menjalankan pemisahan 6-band, iaitu dengan pemisahan globulin beta dalam dua pecahan:
- Globulin Beta 1 ;
- Globulin Beta 2 .
Adakah anda tahu bahawa ...
Di makmal, elektroforesis adalah salah satu teknik yang paling banyak digunakan untuk menganalisis komposisi kualitatif dan kuantitatif protein. Kaedah pemisahan ini didasarkan pada kelajuan penghijrahan yang berbeza zarah-zarah yang dikenakan elektrik, melalui penyelesaian dan media sokongan, di bawah pengaruh medan elektrik .
Albumin adalah protein serum yang paling banyak, dan salah satu yang paling penting dalam tubuh. Ini disintesis oleh hati dan terkandung di atas semua dalam cecair interstisial dan plasma, di mana ia mewakili, dengan sendirinya, kira-kira separuh daripada protein yang beredar. Albumin menjalankan pelbagai fungsi, termasuk pengurusan tekanan osmotik yang betul dan pengangkutan bahan, seperti bilirubin.
Alpha 1 dan 2 globulin terutamanya melakukan fungsi pengangkutan lipid, lemak darah dan hormon. Beta globulin juga membawa bahan-bahan yang ada di dalam darah; antara protein yang paling terkenal dalam kumpulan ini adalah transferrin (digunakan untuk mengangkut besi) dan beta-2 mikroglobulin. Gamma globulins mempunyai, sebaliknya, terutamanya fungsi antibodi.
Sesetengah protein plasma dihasilkan oleh hati (seperti albumin), manakala yang lain dilepaskan ke dalam darah dari sel-sel yang termasuk dalam sistem imun (gamma globulin).
Baca lebih lanjut: Protein Plasma - Fungsi dan Ciri »Elektroforesis: asas asas
Pengenalan : secara amnya, elektroforesis adalah kaedah pemisahan berdasarkan kelajuan penghijrahan yang berbeza bagi zarah-zarah yang dikenakan elektrik, melalui penyelesaian dan medium sokongan berliang dan tidak aktif (seperti kertas, gel agarose atau selulosa asetat) di bawah dorongan medan elektrik. Banyak molekul kepentingan biologi (asid amino, peptida, protein, DNA dan RNA) mempunyai kumpulan-kumpulan yang boleh dioksidakan dalam strukturnya, oleh itu, pada nilai pH yang sesuai, ini terdapat dalam larutan sebagai spesies yang dikenakan elektrik. Di bawah pengaruh medan elektrik, molekul-molekul yang dipindahkan ini berpindah ke arah katod atau anod, bergantung kepada sama ada ia mempunyai caj positif ( kation ) atau caj negatif ( anion ).
Elektroforesis adalah satu kaedah yang membolehkan pemisahan makromolekul dan, khususnya, protein berdasarkan kepada mereka:
- Jisim molekul ;
- Caj elektrik .
Apabila diletakkan dalam persekitaran asas, protein bertindak sebagai asid: kumpulan COOH daripada pelbagai asid amino yang membentuk struktur makromolekul, berpisah ke COO- (zarah negatif) dan H + (ion positif). Oleh itu, protein yang dimuatkan secara keseluruhannya secara negatif dan mobilitas elektroforetik mereka bergerak dari tiang negatif (katod) ke satu yang positif, iaitu ke arah anoda (kerana caj negatif melebihi yang positif).
Kembali ke peperiksaan, sampel pesakit yang mengandungi campuran protein (misalnya protein serum) - diletakkan pada jalur electrophoretic, iaitu sokongan untuk penghijrahan .
Pemisahan dalam lima kumpulan diperoleh melalui penerapan medan elektrik, yang dihasilkan oleh arus langsung, yang membolehkan pecahan protein yang berbeza untuk berhijrah berdasarkan jisim mereka dan caj elektrik mereka.
Hasilnya - yang dipanggil TRACK ELECTROPHORETIC - terdiri dari berbagai puncak dan lengkung, yang mana pecahan protein sesuai, dibahagikan dengan jenis dan kuantiti, yang hadir dalam cairan di bawah pemeriksaan:
- Biasanya, puncak pertama, lebih tinggi dan sempit, ialah ALBUMINA ;
- Seterusnya, kita melihat puncak GLOBULINES, lebih rendah daripada albumin.
Peningkatan atau penurunan dalam amplitud dan intensiti puncak yang membentuk di jalan menunjukkan kehadiran protein yang lebih besar atau lebih kecil dalam setiap kategori.
Adakah anda tahu bahawa ...
Transthyretin sebelum ini dipanggil prealbumin disebabkan oleh mobiliti electrophoretic yang lebih besar berbanding dengan albumin, yang membolehkannya berhijrah ke kedudukan yang lebih anodik.
Untuk maklumat lanjut: Prealbumin - Apa itu »Kenapa ia berjalan
Apakah Electrophoresis untuk?
Elektroforesis digunakan untuk mendiagnosis atau memantau penyakit yang ada di antara penemuan klinikal mereka dengan perubahan kepekatan protein dalam plasma, air kencing atau sampel biologi lain.
Contoh anomali ini boleh berlaku, contohnya, sekiranya:
- Penyakit hati dan buah pinggang ;
- Jangkitan atau keradangan ;
- Multiple myeloma ;
- Sklerosis berbilang .
Elektroforesis: Bilakah peperiksaan ditetapkan?
PENGENALAN : dosis protein total dalam darah - proteinemia - dan albumin - albuminemia - biasanya dimasukkan ke dalam panel kawalan, oleh itu ia sering digunakan dalam penilaian status kesihatan seseorang . Dalam analisis rutin, perubahan parameter ini boleh dianggap BELL ALARM dan boleh mendorong untuk memperdalam gambaran klinikal, terutamanya jika pesakit menunjukkan simptomologi tertentu.
Protein dalam elektroforesis SERUM boleh ditetapkan:
- Dalam kes di mana ujian makmal lain memberikan hasil yang tidak normal, dari segi ketiadaan atau lebih kecil dan lebih banyak kuantiti protein plasma yang berkaitan dengan norma;
- Apabila kehadiran:
- Keradangan dalam proses;
- jangkitan;
- Penyakit autoimun;
- nefropati;
- penyakit hati;
- Penyakit yang dicirikan oleh pengeluaran komponen monoklonal, iaitu antibodi dengan struktur kimia yang serupa, seperti:
- Multiple myeloma dan variannya;
- Macroglobulinemia Waldenström;
- Amyloidosis.
Apabila di dalam air kencing ada konsentrasi protein yang tinggi, sebaliknya, doktor boleh meminta pelaksanaan elektroforesis PRINSIN URINARY . Pemeriksaan ini membolehkan menentukan sumber perubahan, mengesahkan atau menyokong diagnosis.
Elektroforesis PROTEIN DEL LIQUOR boleh ditetapkan apabila diagnosis pelbagai sklerosis disyaki. Dalam kes ini, corak elektroforetik yang ditentukan adalah ciri, kerana ia menyoroti kehadiran band-band oligoklonal yang dipanggil, biasanya tidak terdapat dalam elektroforesis protein serum.
Setelah penyakit itu didiagnosis, elektroforesis dapat dilakukan pada selang waktu biasa untuk:
- Memantau penyakit dari masa ke masa, kemudian ikuti kursus (tindak lanjut);
- Semak keberkesanan protokol terapeutik .
Nilai normal
Dalam orang dewasa dalam kesihatan yang baik, kepekatan normal protein total dalam darah adalah 6.4-8.3 gram setiap desiliter plasma (g / dl).
Albumin (Seroprotein Elektroforesis)
Albumin merupakan 59-69% daripada jumlah protein plasma.
- Nilai rujukan Albumin: 3.6-4.9 g / dl
Alpha 1 globulin
Alpha-1 globulin membentuk 2.0-3.5% daripada jumlah protein plasma.
- Nilai rujukan Alpha 1 globulin : 0.2-0.4 g / dl
Globulin Alpha 2
Alpha-2 globulin menyumbang 6-11% daripada jumlah protein plasma.
- Nilai rujukan Alpha 2 globulins : 0.4-0.8 g / dl
Globulin beta
Beta globulin membentuk 6-12% daripada jumlah protein plasma.
- Nilai rujukan globulin beta: 0.6-1 g / dl
Gamma globulins
Gamma globulins membentuk 9-20% daripada jumlah protein plasma.
- Nilai rujukan Gamma globulin : 0.9-1.4 g / dl
Nota : selang rujukan peperiksaan mungkin berbeza sedikit bergantung kepada umur, jantina dan instrumentasi yang digunakan dalam makmal analisis. Atas sebab ini, lebih baik untuk merujuk rentang yang disenaraikan secara langsung pada laporan. Ia juga harus diingat bahawa hasil analisis harus dinilai secara menyeluruh oleh pengamal umum yang mengetahui riwayat perubatan pesakit.
Nilai Tinggi - Punca
Elektroforesis serum: apa yang menyebabkan peningkatan nilai?
albumin
Penemuan dengan elektroforesis peningkatan albumin serum adalah kerap semasa keadaan mengerikan yang mengurangkan air dari badan dan membawa kepada kemunculan dehidrasi, termasuk:
- Muntah berterusan dan cirit-birit;
- Luka yang meluas;
- Peluh berlebihan;
- Penyakit Addison;
- Koma diabetes.
Dalam pengesanan elektroforetik, kepekatan albumin yang lebih tinggi daripada norma boleh menunjukkan:
- Sarcoidosis (penyakit keradangan sistemik);
- Penyakit buerger atau tromboangioite obliterans (penyakit yang menjejaskan pembuluh darah dan arteri).
ALFA 1 GLOBULINE
Alpha 1 globulin meningkat dalam kes berikut:
- Proses keradangan atau jangkitan sedang berjalan;
- Infarksi jantung;
- Mengambil pil kontraseptif;
- Kehamilan.
ALFA 2 GLOBULINE
Nilai tinggi globulin alfa 2 mungkin menunjukkan kehadiran:
- Penyakit buah pinggang;
- Keradangan atau jangkitan berterusan;
- Infarksi jantung;
- diabetes;
- Sindrom Down;
- Beberapa tumor malignan.
BETA GLOBULINE
Peningkatan globulin beta dalam jejak electrophoretic menunjukkan:
- Kolesterol tinggi dalam darah (hypercholesterolemia);
- Anemia kekurangan zat besi;
- Beberapa kes pelbagai myeloma;
- Kehamilan.
GLOBULINE RANGE
Dalam elektroforesis, peningkatan gamma globulin poliklonal mungkin dikaitkan dengan:
- Penyakit radang kronik;
- Beberapa penyakit sistem imun;
- Artritis reumatoid;
- Sistemik lupus erythematosus;
- Penyakit hati kronik (seperti hepatitis dan sirosis);
- Jangkitan akut dan kronik.
Nilai tinggi gamma globulin monoklonal mungkin menunjukkan, sebaliknya, kehadiran:
- Beberapa tumor;
- Multiple myeloma;
- limfoma;
- Makroglobulinemia Waldenström.
Untuk mengenal pasti mana gamma globulin hadir dalam kumpulan monoklonal dalam corak elektroforetik, adalah mungkin untuk meneruskan imunofiksasi.
Elektroforesis urine
Peningkatan penting dalam protein dalam air kencing oleh elektroforesis dapat menunjukkan kerosakan glomeruli dan tubulus buah pinggang .
Elektroforesis arak
Sekiranya elektroforesis menghasilkan protein yang tidak biasanya terdapat dalam cecair cerebrospinal atau mereka bertambah, terdapat keradangan, jangkitan atau penyakit lain dalam sistem saraf .
Penemuan band oligoklonal dalam pengesanan elektroforetik menunjukkan pelbagai sklerosis .
Nilai Rendah - Punca
Elektroforesis serum: apa yang menyebabkan pengurangan protein?
albumin
Pengurangan albumin dalam pengesanan elektroforetik boleh disebabkan oleh semua syarat yang dicirikan oleh:
- Malnutrisi (khususnya: kekurangan protein akibat pengambilan makanan yang berkurangan);
- Malabsorption menengah ke: enteropati, penyakit seliak, penyakit Crohn, intoleransi protein;
- Peningkatan katabolisme : keradangan teruk, keadaan febrile, cachexia, neoplasma, hipertiroidisme, hypercortisolism, dan sebagainya.
Puncak albumin juga mengurangkan patologi berikut yang mempengaruhi hati (keupayaan sintesis kurang) dan buah pinggang (meningkatkan penghapusan).
Kepekatan albumin yang dikesan dengan elektroforesis serum boleh berkurang, terutamanya apabila ia ditubuhkan:
- Sirosis hati (punca paling biasa);
- Hepatitis akut dan kronik;
- Anomali genetik (sintesis albumin yang cacat);
- Penyakit buah pinggang (terutama sindrom nefrotik dan glomerulonefritis).
Penemuan albumin yang rendah dengan elektroforesis juga diperhatikan semasa kehamilan untuk:
- Pengubahsuaian hormon yang mengubah kebolehtelapan vaskular dan fungsi pelbagai organ wanita hamil;
- Peningkatan penggunaan protein oleh janin.
ALFA 1 GLOBULINE
Alpha 1 globulin dikurangkan kepada elektroforesis dengan kehadiran:
- Penyakit hati yang teruk;
- Emfisema kongenital;
- Penyakit buah pinggang.
ALFA 2 GLOBULINE
Nilai rendah alpha 2 globulin mungkin menunjukkan:
- kekurangan zat makanan;
- Penyakit hati yang teruk;
- Hemolisis.
BETA GLOBULINE
Kepekatan beta globulin yang dikurangkan dalam jejak elektroforesis mungkin menunjukkan:
- kekurangan zat makanan;
- Sirosis hati.
GLOBULINE RANGE
Nilai gamma globulin yang rendah boleh menunjukkan kehadiran pelbagai penyakit sistem imun.
Elektroforesis urine
Biasanya, kepekatan kecil protein dalam air kencing boleh didapati dengan elektroforesis. Oleh itu, keputusan ini tidak menunjukkan kehadiran penyakit tertentu.
Elektroforesis arak
Di bawah keadaan normal, kepekatan jumlah protein dalam minuman keras adalah sangat rendah. Penemuan nilai yang dikurangkan kepada elektroforesis tidak berkorelasi, oleh itu, untuk kepentingan patologi tertentu.
Bagaimana ia dilakukan
Elektroforesis: apa peperiksaan terdiri daripada
- Elektroforesis Whey (ujian darah) : untuk mendapatkan pengesanan elektroforetik pada serum, ia perlu menjalani sampel darah yang mudah dari pembuluh darah. Selanjutnya, serum diperoleh dengan memisahkan pecahan yang mengandungi sel-sel daripada cecair.
- Elektroforesis protein urin (urinalisis) : adalah perlu untuk mengumpul sejumlah kecil urin dalam bekas steril khas. Berdasarkan petunjuk doktor dan makmal, sampel boleh dikumpulkan tanpa masa yang tepat ( rawak ) atau dalam masa 24 jam .
- Elektroforesis minuman keras (analisis cecair serebrospinal) : memerlukan pengumpulan sebilangan kecil minuman keras, melalui penyisipan jarum, di dalam rongga tulang belakang ( lubang lumbar ).
penyediaan
Elektroforesis: persediaan diperlukan?
- Sebelum pensampelan darah, sesetengah makmal mungkin memerlukan anda berpuasa sekurang-kurangnya 10-12 jam. Pada masa ini, sedikit air yang dibenarkan.
- Elektroforesis boleh dilakukan pada air kencing yang dikumpulkan pada masa tertentu (rawak) atau selama 24 jam, jadi perlu mendapatkan kontainer steril yang sesuai terlebih dahulu.
- Setakat elektroforesis minuman keras, bagaimanapun, tiada persediaan khusus diperlukan.
Apa yang boleh mengubah hasil peperiksaan?
Sesetengah ubat boleh menjejaskan hasil elektroforesis, jadi dinasihatkan untuk melaporkan sebarang terapi berterusan kepada doktor. Ubat-ubatan yang boleh mengubah penemuan klinikal termasuk pil kontraseptif, steroid anabolik, androgens, hormon pertumbuhan, insulin dan antibiotik.
Faktor lain yang mungkin mempengaruhi peperiksaan termasuk:
- Hyperlipidemia (kehadiran banyak lemak dalam darah);
- Pentadbiran sejumlah besar cairan intravena;
- Diet vegetarian;
- Sampel yang disuburkan (jika elektroforesis dilakukan pada serum).
Tafsiran Keputusan
Laluan elektroforesis dinilai bersama dengan hasil analisis lain dan memberikan maklumat mengenai status kesihatan pesakit.
Penurunan atau kenaikan berbanding standard protein dalam serum, air kencing atau elektroforesis arak menunjukkan kehadiran penyakit yang berbeza, yang dikenal pasti berdasarkan parameter yang dipengaruhi oleh perubahan.
Perlu diingat bahawa nilai rujukan boleh berubah dari satu makmal ke yang lain. Oleh itu, adalah penting untuk berunding dengan doktor penjagaan utama anda atau pakar rujukan untuk membaca dan menafsirkan hasilnya.
